FAQ

Frequently Asked Questions

자주찾는 질문 씨젠의 모든 제품관련 문의 입니다.

Real-time PCR 검사

Internal Control 시그널이 보이지 않을 때

먼저 데이터 분석에 정확한 fluorophore를 선택하셨는지 프로토콜 상의 가이드라인에 맞추어 검사가 진행되었는지 확인해보시기 바랍니다. 이상이 없다면 PCR inhibitor 에 의한 PCR 반응저해나 추출상의 문제일 수 있습니다.
10-100배정도 추출된 핵산을 희석해서 다시 PCR해보시거나 (PCR inhibitor 문제), 같은 샘플의 다른 aliquot으로 재검, 또는 새로 검체 채취하여 재검 하시는 방법을 권장해드립니다. 또한 시약의 보관 상태와 유효기간 확인하시어 이상이 있을 때는 새로운 키트를 사용하시기 바랍니다.

Negative Control 에서 시그널이 관찰되거나 위양성 결과를 보일 때

추출과정이나 PCR 과정 중에 cross contamination 이 일어났을 수 있습니다. 실험공간과 장비를 sodium hypochlorite와 ethanol로 깨끗이 소독하신 후 핵산추출부터 다시 해보시기를 권장해드립니다. 필요에 따라 새로운 소모품 및 시약을 사용하시어 재검사 해주십시오. 오염방지를 위해서 검사 시 반드시 필터팁을 사용하시고, 검사공간을 주기적으로 클리닝해주시기 바랍니다. Real-time PCR(CFX96 또는 AB7500 장비 사용시)은 fluorophore의 detection이 tube의 cap을 통과하여 이루어집니다. 네임펜등을 이용한 마킹은 반드시 real-time PCR tube 벽면을 이용해주시기 바랍니다.

Positive Control 에서 시그널이 관찰되지 않거나 위음성 결과를 보일 때

먼저 데이터 분석에 정확한 fluorophore의 선택여부와 시약의 유효기간, 프로토콜 상의 가이드라인에 맞추어 검사가 진행되었는지 확인해보시기 바랍니다. 또한 시약의 보관 상태와 유효기간 확인하시어 이상이 있을 때는 새로운 키트를 사용하시기 바랍니다.

Conventional PCR 검사

Internal Control 밴드가 보이지 않을 때

먼저 가이드라인에 맞추어 검사가 진행되었는지 확인해보신 후 이상이 없다면 PCR inhibitor에 의한 반응이 저해되었을 가능성이 있습니다. 시료 또는 template DNA를 10-100배 정도 희석하신 후 PCR을 다시 해보시기 바랍니다. 또한 시약의 보관 상태와 유효기간 확인하시어 이상이 있을 때는 새로운 키트를 사용하시기 바랍니다.

Agarose gel 상에서 PCR 밴드가 보이지 않을 때

Et-Br staining이 잘 되지 않았거나 밴드 확인 시 UV에 과다 노출된 경우 밴드를 확인할 수 없습니다. Et-Br staining 이 잘되지 않았을 경우 1100 ± 100 rpm 의 shaker에서 약 30분 가량 1/10,000 dilution 10mg/ml Et-Br에 shaking 시켜주시기 바랍니다.

Negative Control 에서 Band가 관찰되거나 위양성 결과를 보일 때

추출과정이나 PCR 과정중에 교차오염이 일어났을 수 있습니다. 실험공간과 장비를 sodium hypochlorite와 ethanol로 깨끗이 소독하신 후 핵산추출부터 다시 해보시기를 권장해드립니다. 필요에 따라 새로운 소모품 및 시약을 사용하시어 재검사 해주십시오. 오염방지를 위해서 검사 시 반드시 필터팁을 사용하시고, 검사공간을 주기적으로 클리닝해주시기 바랍니다.

Positive Control 에서 Band가 관찰되지 않거나 위음성 결과를 보일 때

시약의 유효기간, 프로토콜 상의 가이드라인에 맞추어 검사가 진행되었는지 확인해보시기 바랍니다. (Premix 형태로 미리 만들어 보관하실 경우 Enzyme 효능이 급격히 떨어져 민감도가 저해될 수 있습니다. 반드시 검사 가이드에 따라 검사를 진행해주십시오.)

오랜기간 동안 상온에서 검체 또는 핵산을 보관했을 때

Low titer의 검체 혹은 핵산은 단 하루 만에도 degradation이 일어나 결과에 영향을 줄 수 있습니다. 상온에서의 보관은 절대 피해주시고 이 경우 재추출하여 검사를 진행해주시기 바랍니다.

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