혁신적인 ACP™ 기술
ACP™는 primer 디자인 기술로 specificity를 향상 시켜 정확한 PCR product를 얻을 수 있다. 이와 같은 ACP™의 장점은 regulator 부위를 가지는 ACP™ 구조에 있다. Regulator 부위를 구성하는 inosine은 G, A, T, C에 비해 낮은 Tm 값을 가지는 universal base이므로 특정 온도에서 "bubble like structure"를 형성하여 primer가 template와 비특이적으로 결합되는 것을 차단하고 3'-target core sequence 부위만이 template의 원하는 부위와 결합할 수 있게 하여 PCR의 specificity를 향상 시키는 역할을 한다.
높은 민감도와 특이도, 재현성 구현
High sensitivity
적은 양의 template를 쓰더라도 target 유전자를 정확하게 증폭한다.
High specificity
짧은 target specific 염기서열 (약 10mer)에도 불구하고 ACP™의 구조적인 독창성과 ACP™를 이용한 독특한 PCR 반응단계로 target product의 증폭 효율이 매우 높다.
High reproducibility
ACP™는 정확성이 높기 때문에 PCR 수행시 높은 재현성을 나타낸다.
일반적인 Short/Long 프라이머와 ACP™ 프라이머 간의 비교
ACP™ 기술은 프라이머의 2 개의 부분(3'- 세그먼트와 5'- 세그먼트)으로 나누어져 template의 서열과 완벽하게 일치 할 때만 결합하여 확장될 수 있는 구조적인 특징을 갖추고 있다.
10 mer 타겟 시퀀스의 경우
Lane 1: 짧은 프라이머(10~14mer)는 낮은 annealing 온도에서만 증폭이 가능하므로 target product가 생성되지 않는다.
Lane 2: 정확도 높은 결과를 가지기 위해서는 보통 높은 annealing 온도를 요구하며, 이를 위해 짧은 프라이머에 universal 염기서열인 tail을 붙이는 경우가 있으나 이 또한 universal 염기서열로 인해 false product가 생성된다.
Lane 3: ACP™는 regulator부위를 가지는 독특한 구조와 2단계 PCR 과정을 통해 높은 annealing 온도에서 전체 ACP™와 100% sequence match를 가지는 1차 PCR product만 증폭되므로 target 유전자가 정확히 증폭된다.
＊Lane1: Short primer(only target 10 mer) / Lane2: Longer primer(target 10 mer+tail) / Lane3: ACP(10 mer+regulator+tail) / M: 100bp size marker
19 mer 타겟 시퀀스의 경우
Random PCR 뿐 아니라, 약 19mer의 프라이머를 쓰는 일반적인 PCR 경우에도 ACP™는 Non-ACP™ 프라이머 보다 훨씬 더 정확하게 유전자를 증폭된다.
＊ Lane1: Primer(only target 19 mer) / Lane2: ACP(19 mer+regulator+tail) / M: 100bp size marker
